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膏方又称膏剂，是中医药的 8 种剂型（丸、散、膏、 丹、酒、露、汤、锭）之一，它以大规模复方汤剂为基础， 经浓缩煎煮后加入蜂蜜或阿胶后制成的一种浓稠的半 固体剂型。参茸鹿胎膏为棕褐色块状物，具有轻微的 腥味和略带咸味的味道，该药物由人参、当归、川穹、鹿 茸、鹿胎、化橘红、附子（制）等 45 种中药组成，其主要功能为补虚生精、益肾壮阳的功效，主治经血不足、妇 女虚寒。
1 材料与仪器
1.1 材料与试剂
参茸鹿胎膏、人参、当归、川芎（吉林省天强制药有 限公司）；参茸鹿胎膏-2、参茸鹿胎膏-3、参茸鹿胎膏-4 （委托吉林省天强制药有限公司制备，除分别不含有人 参、鹿茸和化橘红外，其他原料和生产工艺与参茸鹿胎 膏完全相同）；硅藻土（灵寿县汇资矿产品有限公司）； 柚皮苷标准品、人参皂苷 Rg1 标准品、乌头碱标准品 （中国药品生物制品检验所）；硅胶 G（青岛海洋化工 厂）；三氯甲烷、甲醇、正丁醇、氨水试液、石油醚（分析 纯）；水为纯化水。
1.2 仪器
Agilent 1200series 高效相色谱仪（美国安捷伦公 司）；Shimadzmn UV-2450 紫外分光光度计、FA1104 天 平（上海精密科学仪器有限公司）；RE-52-99 旋转蒸发 仪（上海亚荣生化仪器厂）；博迅GZX-9140MBE 电热鼓风 干燥箱（上海博讯实业有限公司）；D ZF-6050 真空干 燥箱（上海博讯实业有限公司）；
2 方法与结果
2.1 人参成分的鉴定
2.1.1 参茸鹿胎膏供试溶液的制备
取参茸鹿胎膏样 品 10 g，切碎置于锥形瓶中，加入 10 g 硅藻土，混匀、 研磨，加入 100 mL 甲醇，加热回流过滤 30 min，将滤 液蒸发干燥，加入 30 mL 水溶解残渣后，倒入分液漏 斗中，用 50 mL 三氯甲烷对残渣进行振摇提取，放置 待分层后弃去三氯甲烷溶液，保留水溶液层，用 20 mL 水饱和的正丁醇提取水溶液 3 次，合并提取液，40 mL 氨水试液洗涤，除去氨水层，将正丁醇层蒸干，药物残渣用 1 mL 甲醇溶解作为供试品溶液。
2.1.2 人参阳性供试夜的制备
取人参0.5g，加入40mL 三氯甲烷，加热回流 1 h，弃去三氯甲烷液，将药渣中的 溶剂挥发干净，然后于残渣中加入 0.5 mL水进行搅拌 加湿，再于残渣中加入 10 mL 水饱和正丁醇溶液，将 溶液进行超声处理约 30 min，吸取超声处理后的上清 溶液，加入 3 倍量氨试液，将其振摇均匀，然后将其放 置，待分层后，取出上层液并蒸发至干，再于残渣中加 入 1 mL 甲醇溶液，用甲醇溶液将残留物进行溶解，作 为供试品溶液。
2.1.3 人参皂苷Rg1 标准液的制备
取人参皂苷Rg1 对照品，于对照品中加入一定量的甲醇溶液，将其制备 成每 1 mL 含 1 mg 的溶液，作为人参皂苷 Rg1 标准品 溶液。
2.1.4 阴性对照液的制备
取参茸鹿胎膏-2 样品 10 g， 并按照“2.1.1”项下相同的方法制备成阴性对照溶液。
2.1.5 薄层色谱分析
根据薄层色谱法（中国药典 2015 年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取上述溶液各 5 µL， 在同一硅胶 G 薄层板上点样，用三氯甲烷-乙酸乙酯甲醇-水（15∶40∶22∶10）放置在 10 ℃以下的下层溶 液作为展开剂展开，用 10%硫酸乙醇溶液进行喷雾， 并在 105 ℃加热至斑点显色清晰。在供试品的色谱 中，在与对照药材和对照品色谱相对同的位置上，分别 显相同颜色的斑点，且斑点清晰，表明阴性对照无干 扰，可以定性鉴别为该处方中的人参，结果见图 1。
2. 2 当归和川芎成分的鉴别
2.2.1 参茸鹿胎膏供试溶液的制备
取参茸鹿胎膏样 品 10 g，切碎置于锥形瓶中，加入 30 mL乙醚浸泡至过 夜，将浸泡完全的样品进行超声处理约 10 min，超声处 理后将其过滤，将滤液进行浓缩，直至浓缩约 2 mL，将 其作为供试品溶液。
2.2.2 当归、川芎阳性供试液的制备
另外取 1 g 当 归对照药材以及 1 g川芎对照药材，加入 20mL乙醚浸 泡，采用“2.2.1”项下同样的方法制备出对照药材溶液。
2.2.3 阴性对照液的制备
取参茸鹿胎膏-3 样品 10 g， 并按照“2.2.1”项下相同的方法制备成阴性对照溶液。
2.2.4 薄层色谱分析
根据薄层色谱法（中国药典 2015 年版一部附录Ⅵ B）试验中提到的方法，吸取上 述 4 种溶液各 2 L，置于同一硅胶Ｇ薄层板，以展开 剂：正己烷-乙酸乙酯（9∶1）展开，在紫外光灯（365 nm） 下检视。在供试品的色谱中，在与对照药材色谱相 同的位置上，显相同颜色的荧光斑点，且斑点清晰，表 明阴性对照无干扰，可以用于定性鉴别该处方中的当 归和川芎。
2.3 柚皮苷含量测定
2.3.1 供试品溶液制备
取参茸鹿胎膏样品 5 块，切 碎后混合均匀，精密称量置于锥形瓶中，浸泡过夜后， 超声处理约 40 min，取出并称定重量，用 50%乙醇补 足失掉的重量，摇匀同时滤过，取滤液，即制备成供试 品溶液。
2.3.2 阳性对照品溶液制备
精密称取柚皮苷对照品 适量，加甲醇配制成每 1 mL 含 70 µg 的溶液，振摇均匀即制备成了对照品溶液。
2.3.3 阴性样品溶液制备
取参茸鹿胎膏-4，并按照 “2.3.1”项下相同的方法制备成阴性对照溶液。
2.3.4 色谱分析与含量测定
色谱柱：AgilentC1（8 4.6mm 200 mm，5 µm）；流动相：甲醇-0.1%冰醋酸（31∶69）； 流速：1.0 mL/min；柱温：35 ℃；检测波长：283 nm；理论 板数按柚皮苷峰计算应不低于 3 000。
3 结论与讨论
采用高效液相色谱法测定参茸鹿胎膏中柚 皮苷的含量，在研究流动相的选择过程中，对多种流动 相以及流速进行了考察，曾试用乙腈 0.088%甲酸水 溶液（23.3∶76.7）、甲醇 0.2%冰醋酸、甲醇-醋酸-水 （30∶4∶70）作为流动相，但制剂中柚皮苷色谱峰 分度较差，最终采用甲醇 0.1%冰醋酸（31∶69）作为 本试验流动相，通过对色谱条件的考察及方法学的考 察证明，该操作可行，精密度、重复性、稳定性和准确性 良好，可以作为本试验的流动相。
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