布鲁菌病感染的鉴定分析！

布鲁菌病又称波状热，是布鲁菌所引起的动物源 性传染病。在我国，羊为布鲁菌病的主要传染源，牧 民或兽医接生羔羊为主要传播途径，故该病在我国主 要流行于东北三省、西北部及内蒙古等牧区较为集中的地区。布鲁菌病全年均可发病，但有明显的季节 性，羊种布鲁菌病春季开始发病，夏季达高峰，秋季发 病率下降；牛种布鲁菌病在夏、秋季发病率较高。 布鲁菌病临床表现多样，临床上以长期发热、多汗、乏 力、关节疼痛、肝脾及淋巴结肿大为特点，多为慢性感 染且并发症较多。布鲁菌病患者多数是以其他疾病 来就诊，临床上容易漏诊或误诊。由于布鲁菌自身生 长缓慢，鉴定耗时较长，环境要求高等特点，导致鉴定 正确率低，容易错报或漏报。

１ 临床资料

患者，男，７５岁，于２０１８年３月牙周脓肿后出现 发热，伴畏寒，寒战，最高体温３８ ℃，无咳嗽、咳痰，无 恶心、呕吐。因反复发热１０ｄ，尿痛３ｄ，尿潴留１ｄ入 院。入院查体：神志清晰，精神欠佳，全身皮肤黏膜无 黄染，全身浅表淋巴结未触及肿大，头颅无畸形。实 验室检查：白细胞计数为８．１×１０９／Ｌ；中性粒细胞百 分比为６７．３％；红细胞总数、血红蛋白、血小板等无明 显异常，红细胞沉降率（ＥＳＲ）为９ｍｍ／ｈ。

２ 细菌培养、形态观察及鉴定

血培养第４天需氧瓶报阳，抽血培养物涂片进行 革兰染色，镜下见革兰阴性小杆菌及短小杆菌，呈细 沙样堆积，转种血平板，麦康凯平板及嗜血巧克力琼 脂平板，于５％的 ＣＯ２、３５ ℃条件下培养，次日形成细 小针尖样菌落。继续培养１ｄ，革兰染色后镜检见细 小杆菌，氧化酶实验阳性，触酶实验阳性。用生理盐 水把上 述 菌 落 浓 度 调 成 至 ０．５０～０．６３ 麦 氏 浓 度 （ＭＣＦ），用全自动 ＶＩＴＥＫ２Ｃｏｍｐａｃｔ上机鉴定，６ｈ 后 自 动 鉴 定 结 果 为 吉 拉 尔 玫 瑰 单 胞 菌，可 信 度 为 ９６％，生物编码１０００００１３００７０１００１。由于对吉拉尔玫 瑰单胞菌了解不足，查阅文献后，经小组讨论并结合患者临床资料和菌落形态怀疑布鲁菌。 通过柯兹罗夫斯基染色（柯氏染色）法，菌落呈红 色球杆状，大肠埃希菌 ＡＴＣＣ２５９２２作为对照菌呈绿 色。第２次鉴定，将菌落浓度调成１．０ ＭＣＦ，８．２５ｈ 后 ＶＩＴＥＫ２Ｃｏｍｐａｃｔ鉴定为马耳他布鲁菌，可信度为 ９８％。生物编码 １０００００１３００２０１００１。吉拉尔玫瑰单 胞菌和马耳他布鲁菌两者生化反应仅琥珀酸盐产碱 （ＳＵＣＴ）、ＥＬＬＭＡＮ 反应有区别，吉拉尔玫瑰单胞菌 均为阳性，马耳他布鲁菌均为阴性。

３ 血清学试验

患 者 血 清 进 行 抗 体 检 测，布 病 虎 红 平 板 阳 性， 凝集。

４ 讨 论 　　

对此，上海博迅认为布鲁菌通过吸入，皮肤擦伤，摄取或通过黏膜入侵 宿主细胞，布鲁菌最重要的特征是具有在吞噬细胞和非 吞噬细胞内的生存和繁殖的能力。布鲁菌不产生经 典的毒力因子，主要毒力因子为脂多糖（ＬＰＳ），Ｔ４ＳＳ 分泌系统和 ＢｖｒＲ／ＢｖｒＳ系统。布鲁菌病的治疗主 要采用双药联合治疗，最常见抗菌药物的组合为氟喹 诺酮与利福平。目前，有研究使用其他方法破坏布鲁 菌 细 胞 内 复 制，例如牛磺熊去氧胆酸或人参皂苷Ａ。 本病例中血培养第４天报阳，培养出细小杆菌， 首次调菌落浓度为０．５０～０．６３ ＭＣＦ，因此鉴定为吉 拉尔玫瑰单胞菌。对患者进行调查可知，患者从事羊 养殖业。经过查资料和小组讨论，布鲁菌为革兰阴性 球杆菌或短杆菌，单个或成对、短链状排列，无鞭毛及 芽孢；玫瑰单胞菌通常为革兰阴性、呈链状排列小 球杆菌。两者形态学特点 相 似，且 生 化 反 应 差 别 较 小，难以鉴别。分析原因，布鲁菌菌落浓度配制不正 确，会导致 ＶＩＴＥＫ２Ｃｏｍｐａｃｔ鉴定系统鉴定错误，布 鲁菌菌落浓度应为１．０ＭＣＦ。重新调１．０ＭＣＦ上机 鉴定，第２天鉴定为马耳他布鲁菌。同时进行柯氏染 色，染色后细菌呈红色球 杆 状。补 充 了 部 分 生 化 反 应，脲酶试验阳性。抽取患者血清进行抗体检测，最 终确定为马耳他布鲁菌。通过这次仪器错误的鉴定,意识到对布鲁菌属的鉴定应结合形态染色特征、补充 试验，了解患者近期接触史、旅行经历等临床资料进 行鉴别。细菌学检测和血清学检测是布鲁氏病的主 要诊断方法，其中细 菌 学 检 测 是 诊 断 布 鲁 菌 病 的 “金标准”，但耗时较长，环境要求高，检出阳性率低， 灵敏度不高。