紫外杀菌在洁净工作台中材料与方法

研究者们对洁净工作台无菌操作空间环境的要求越来越高，采用单纯的紫外杀菌时间相对较长.借助无毒无害的化学杀菌剂辅助紫外杀菌将会有效地缩短杀菌时间，洁净工作台的利用更高效，同时也可延长紫外灯的使用寿命.

1.1 原料实验室自制果汁，并在室温下开盖放置 36 h，果汁与空气直接接触，使果汁在自然环境条件下污染一定浓度的杂菌.

1.2 培养基普通营养培养基：胰蛋白胨 5 g，酵母浸粉 2.5 g，葡萄糖 1.0 g，琼脂粉 15.0 g，pH 值 7.0，去离子水1 000 mL，121 ℃灭菌 30 min.

1.3 主要仪器与设备YXQ-LS-70A 型高压灭菌锅（上海博讯实业有限公司医疗设备厂）；BGZ-240 型烘干箱（上海博讯实业有限公司医疗设备厂）；SW-CJ-2D 型洁净工作台（上海博讯实业有限公司医疗设备厂）；SPX-150B-Z型生化培养箱（上海博讯实业有限公司医疗设备厂）.

1.4 含菌培养皿的准备本文采用直径为 9 cm 的培养皿（表面积为 3.14×4.52=63.585 cm2），按照平板菌落计数法测定自制果汁中细菌污染情况，重复 3 次，取平均值.然后吸取自制饮料 1.0 mL 均匀涂布至普通培养基上，涂布后的含菌培养基上细菌分布密度可由公式（1）计算得到.含培养基上细菌分布密度（CFU∙cm-2） = 自制果汁中细菌总数（CFU∙mL-1）培养皿表面积（cm2）

1.5 洁净工作台乙醇辅助紫外杀菌效果的确定将 21 个含菌培养基分为 7 组，分别置于洁净工作台（操作空间为 1150×500×500 mm）中，将培养皿盖打开，然后开启紫外灯（40 W）照射 30 min，每隔 5 min 取出 1 组培养皿.洁净工作台中均匀喷入 10 mL 75%乙醇溶液，然后按照上述方法将开盖的含菌培养基置于洁净工作台中紫外灯照射 30 min，未经紫外线照射的作为阴性对照，取出的培养皿于 37 ℃条件下培养 24 h，进行细菌总数计数，取 3 次重复的平均值.1.6 洁净工作台无菌环境维持时间的确定将开盖的含菌培养基置于洁净工作台中，采用乙醇辅助紫外线照射 25 min，然后将紫外灯关闭，培养皿继续置于洁净工作台中 48 h，每隔 12 h 取出 1 组培养皿，置于 37 ℃下培养 24 h，进行菌落计数，每组 3个重复，取平均值.